出現(xiàn)肩峰或分叉

1、樣品體積過大 用流動相配樣,總的樣品體積小于*峰的15%

2、樣品溶劑過強(qiáng) 采用較弱的樣品溶劑

3、柱塌陷或形成短路通道 更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件

4、柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效 更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品

5、進(jìn)樣器損壞 更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子

鬼峰

1、進(jìn)樣閥殘余峰 每次用后用強(qiáng)溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗

2、樣品中未知物 處理樣品

3、柱未平衡 重新平衡柱,用流動相作樣品溶劑 (尤其是離子對色譜)

4、(TFA)氧化(肽譜) 每天新配,用抗氧化劑5、水污染(反相) 通過變化平衡時間檢查水質(zhì)量，用HPLC級的水

液相色譜儀保留時間變化

1、柱溫變化 柱恒溫，必要時需配置恒溫箱

2、等度與梯度間未能充分平衡 至少用10倍柱體積的流動相平衡柱

3、緩沖液容量不夠 用>25mmol/L的緩沖液

4、柱污染 每天沖洗柱

5、柱內(nèi)條件變化 穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動相

6、柱快達(dá)到壽命 采用保護(hù)柱

保留時間延長

1、流速下降 管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡

2、硅膠柱上活性點(diǎn)變化 用流動相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱

保留時間縮短

1、流速增加 檢查泵,重新設(shè)定流速

2、樣品超載 降低樣品量

3、鍵合相流失 流動相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向

4、流動相組成變化 防止流動相蒸發(fā)或沉淀

5、溫度增加 柱恒溫

基線噪聲

1、氣泡(尖銳峰) 流動相脫氣,加柱后背壓

2、污染(隨機(jī)噪聲) 清洗柱,凈化樣品,用HPLC級試劑

3、檢測器燈連續(xù)噪聲 更換氘燈

4、電干擾(偶然噪聲) 采用穩(wěn)壓電源,檢查干擾的來源(如水浴等)

5、檢測器中有氣泡 流動相脫氣,加柱后背壓

峰展寬

1、進(jìn)樣體積過大 

2、在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展 進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散

3、數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢 設(shè)定速率應(yīng)是每峰大于10點(diǎn)

4、檢測器時間常數(shù)過大 設(shè)定時間常數(shù)為感興趣*峰半寬的10%

5、流動相粘度過高 增加柱溫,采用低粘度流動相

6、檢測池體積過大 用小體積池,卸下熱交換器

7、保留時間過長 等度洗脫時增加溶劑含量也可用梯度洗脫

8、柱外體積過大 將連接管徑和連接管長度降至zui小

9、樣品過載 進(jìn)小濃度小體積樣品

峰拖尾

1、柱超載 降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相

2、峰干擾 清潔樣品,調(diào)整流動相

3、硅羥基作用 加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動相PH值,鈍化樣品

4、死體積或柱外體積過大 連接點(diǎn)降至zui低,對所有連接點(diǎn)作合適調(diào)整,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管

5、柱效下降 用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護(hù)柱