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如何提高液相色譜柱柱效

更新時間:2017-01-17      點擊次數(shù):3324

1、提高液相色譜柱柱效的方法

(1)降低移動相的流速,但會使分析時間延長。

(2)減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。

(3)減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會減小。

(4)選用低粘度的移動相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。

(5)適當提高柱溫,可降低移動相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。

(6)盡量減小停滯移動相的體積,但卻加快了移動相的流速。

  從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是互相和制約的。只有通過對柱效值的跟蹤測算,對自己分析方法不斷的研究和實踐,才能找到*的工作條件。

2、對柱效值進行跟蹤測算應(yīng)注意的問題

   我們也應(yīng)記住柱效值并不足以預測在所有條件下的柱性能,對大多數(shù)色譜工作者來說,柱性能指的是色譜柱用于特定分離的能力,而僅僅有高柱效并不能保證這種分離能力。

  不管用什么特定的測試方法,都會有幾個參數(shù)影響柱效的測定。這些參數(shù)包括:洗脫液的成分和粘度及其線流速,測定塔板數(shù)所用的溶質(zhì),溫度,柱長,填料裝填方式,顆粒度,還有所選用的測量和計算方法。而測量和計算方法對柱效值的確定起著極大的作用。

   假如一個色譜峰真是正態(tài)峰型,那么每種計算方法都會得到同樣的結(jié)果。然而即使一些比較理想的儀器和傾向于得到對稱峰型的溶質(zhì),由于柱內(nèi)的槽或空隙,也會出現(xiàn)非正態(tài)峰型。所以不同的計算方法將會得到相差較大的n值。通常偏離正態(tài)模型的峰型表示為“前延”或“拖尾”。對于這些峰型,越在峰的高處測量,計算的理論塔板數(shù)值就越大(準確性越低)。在許多情況下,色譜工作者需要能反映整個峰型(包括拖尾)的柱效值,同時為了保證定量的重復性,也需要色譜峰很好的對稱性。這時對色譜峰非對稱性zui敏感的計算方法。如果目的僅僅是要監(jiān)測色譜柱從*次使用到使用壽命結(jié)束這一過程中的柱效,那么以上任何一種方法都可以,應(yīng)選擇zui簡便的方法。

 

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